کاربرد: کشت جنین انسان از مرحله زایگوت تا بلاستوسیست و انتقال جنین به رحم
REF: RS-SC30 30 ml
REF: RS-SC10 10 ml
بروشور محیط کشت تک مرحله ای جنین Single (دانلود)
پروانه ساخت محیط کشت تک مرحله ای جنین Single (دانلود)
گزارش آزمون استریلیتی محیط کشت تک مرحله ای جنین Single (دانلود)
گزارش آزمون تب زایی به روش LAL محیط کشت تک مرحله ای جنین Single (دانلود)
گزارش آزمون سمیت ژنی محیط کشت تک مرحله ای جنین Single (دانلود)
اطلاعات کلی
کاربرد: کشت جنین انسان از مرحله زایگوت تا بلاستوسیست و انتقال جنین به رحم
شرایط و مدت زمان نگهداری: در دمای یخچال ˚C)8-2) و به دور از تابش نور نگهداری شود. این محصول تا 10 هفته پس از تولید (در صورت باز نشدن بسته بندی استریل) قابل استفاده است.
ملاحظات دفع پسماند: باید طبق دستورالعمل دفع پسماندهای آزمایشگاهی صورت گیرد.
ترکیبات: این محصول حاوی بافر بیکربنات، گلوکز، لاکتات، پیرووات و تمامی 20 اسیدهای آمینه مورد نیاز برای حمایت از رشد و تکوین جنین انسان در شرایط آزمایشگاهی می باشد
روش استفاده
کارایی پروتکل زیر برای کشت جنین انسان از مرحله زایگوت تا بلاستوسیست و نیز انتقال جنین به رحم نشان داده شده است و این پروتکل صرفا به عنوان یک مثال ارائه می گردد:
1- در حدود 12-8 ساعت پیش از استفاده، میزان مورد نیاز از محیط کشت باید با میزان (حجمی-حجمی) از آلبومین سرم انسان یا HSA (Human Serum Albumin) با غلظت mg/ml 100جهت تامین مکمل پروتئینی مخلوط گردد.
2- حجم های µl25-100 و یا بالاتر از محیط کشت در دیش های کشت قطره گذاری شده و سپس توسط روغن معدنی (Mineral Oil) بطور کامل پوشانده شود.
3- پیش از قرار دادن جنین ها، دیش آماده شده در مرحله قبل برای مدت زمان کافی جهت حصول اطمینان از برقراری تعادل pH و دما در انکوباتور CO2 قرار داده شود. بسته به شرایط موجود، این زمان ممکن است بین 8 تا 12 ساعت متغیر باشد. در صورتیکه محیط کشت و روغن معدنی پیش از آماده سازی دیش ها در انکوباتور به تعادل رسیده باشند، مدت زمان مورد نیاز برای برقراری تعادل دیش آماده شده کوتاه تر خواهد بود.
4- در روز یک تکوین جنین، زایگوت ها در قطرات محیط کشت قرار داده شده و تا روز سوم تکوین (مرحله 8-4 سلولی)، در انکوباتور کشت داده شوند.
5- کشت طولانی تر تا مرحله بلاستوسیست نیازمند انتقال جنین های مرحله کلیواژ به محیط کشت تازه در یک دیش جدید آماده سازی شده و به روش فوق می باشد.
6- برای انتقال جنین به رحم در روز سوم تکوین (مرحله کلیواژ) و یا در روزهای پنجم یا ششم (مرحله یلاستوسیست) از µl 20-30 از محیط کشت به تعادل رسیده استفاده گردد.
7- بلافاصله قبل از انتقال جنین، کانتر انتقال توسط محیط کشت شستشو داده شود.
هشدارها
1- کاربر میبایست بطور کامل این راهنما را مطالعه کند و پیش از استفاده از محصول، آموزشهای لازم را دریافت نماید.
2- این محصول برای تزریق به بدن، غیر قابل استفاده است.
3- از استریل کردن مجدد محصول خودداری شود.
4- در صورت مشاهده موارد زیر از استفاده از محصول خودداری گردد:
- وجود آسیب در بستهبندی استریل
- سپری شدن تاریخ انقضاء
- تغییر رنگ، کدورت و یا وجود ذرات معلق یا رسوب.
5- این محصول حاوی آنتی بیوتیک جنتامایسین سولفات میباشد، لذا استفاده از آن در بیمارانی که نسبت به این آنتی بیوتیک حساسیت دارند باید همراه با احتیاط باشد.
6- در زمان استفاده از این محصول به منظور جلوگیری از آلودگی میبایست از روشهای آسپتیک استفاده شود.
7- این محصول تا 7 روز پس از باز شدن بستهبندی استریل قابلیت استفاده ایمن را دارد.
نکته: در بیشتر موارد، غلظت CO2 در انکوباتور به میزان 7-5 درصد منجر به قرارگیری pH محیط کشت در بازه مورد پذیرش 4/7 - 2/7 خواهد شد. با این وجود، تنظیم دقیق غلظت CO2 برای دستیابی به pH تقریبی 3/7 (33/7 - 27/7) به عنوان pH بهینه، به چندین فاکتور از جمله ویژگیهای فیزیکی انکوباتور و ارتفاع جغرافیایی وابسته است. در نتیجه، توصیه میگردد که هر آزمایشگاه غلظت CO2 مورد نیاز برای دستیابی به pH بهینه 3/7 در محیط کشت را محاسبه نماید.