• 

محیط کشت HTF

HTF Medium (Human Tubal Fluid)

خلاصه

کاربرد: جمع آوری توده های کومولوس_تخمک (COCs) و کشت جنین انسان از مرحله زایگوت تا کلیواژ (روز سوم)

REF: RS-HTF100        100 ml


بروشور محیط کشت HTF (دانلود)

پروانه ساخت محیط کشت HTF (دانلود)

گزارش آزمون استریلیتی محیط کشت HTF (دانلود)

گزارش آزمون تب زایی برون تنی محیط کشت HTF (دانلود)

گزارش آزمون تحریک زایی محیط کشت HTF (دانلود)

گزارش آزمون حساسیت زایی محیط کشت HTF (دانلود)

گزارش آزمون سمیت ژنی محیط کشت HTF (دانلود)

گزارش آزمون سمیت سلولی محیط کشت HTF (دانلود)

گزارش آزمون طول عمر بسته بندی محیط کشت HTF (دانلود)

اطلاعات کلی

کاربرد: جمع آوری توده های کومولوس_تخمک (COCs) و کشت جنین انسان از مرحله زایگوت تا کلیواژ (روز سوم)

شرایط و مدت زمان نگهداری: در دمای یخچال (℃ 2-8) و به دور از تابش نور نگهداری شود. این محصول تا 10 هفته پس از تاریخ تولید (در صورت باز نشدن بسته بندی استریل) قابل استفاده است.
 
ملاحظات دفع پسماند: باید طبق دستورالعمل دفع پسماندهای آزمایشگاهی صورت گیرد.
 
ترکیبات: این محصول حاوی بافر بیکربنات، گلوکز، لاکتات و پیرووات مورد نیاز برای حمایت از رشد و تکوین تخمک و جنین انسان در شرایط آزمایشگاهی می باشد.

روش استفاده

کارایی پروتکل زیر برای جمع آوری توده های کومولوس_تخمک (COCs) و کشت جنین انسان از مرحله زیگوات تا کلیواژ (روز سوم)نشان داده شده است و این پروتکل صرفا به عنوان یک مثال ارائه می گردد:

1- در حدود 12-8 ساعت پیش از استفاده، میزان مورد نیاز از محیط کشت باید با میزان  (حجمی-حجمی) از آلبومین سرم انسان یا HSA (Human Serum Albumin) با غلظت mg/ml 100جهت تامین مکمل پروتئینی مخلوط گردد.
2- حجم های  µl100-25 و یا بالاتر از محیط کشت در دیش های کشت قطره گذاری شده و سپس توسط روغن معدنی (Mineral Oil) بطور کامل پوشانده شود.
3- پیش از قرار دادن توده های COCs و یا جنین ها، دیش آماده شده در مرحله قبل برای مدت زمان کافی جهت حصول اطمینان از برقراری تعادل pH و دما در انکوباتور CO2 قرار داده شود. بسته به شرایط موجود، این زمان ممکن است بین 8 تا 12 ساعت متغیر باشد. در صورتیکه محیط کشت و روغن معدنی پیش از آماده سازی دیش ها در انکوباتور به تعادل رسیده باشند، مدت زمان مورد نیاز برای برقراری تعادل دیش آماده شده کوتاه تر خواهد بود.
4- پس از انتقال توده های COCs به قطرات محیط کشت، دیش تا زمان دنودیشن در انکوباتور CO2 نگهداری شود.
5- در روز یکم تکوین جنین، زایگوت ها در قطرات محیط کشت قرار داده شده و تا روز سوم تکوین (مرحله 8-4 سلولی) در انکوباتور کشت داده شوند.


 
هشدارها

1- کاربر می‌بایست بطور کامل این راهنما را مطالعه کند و پیش از استفاده از محصول، آموزش‌های لازم را دریافت نماید.
2-  این محصول برای تزریق به بدن، غیر قابل استفاده است.
3- از استریل کردن مجدد محصول خودداری شود.
 4- در صورت مشاهده موارد زیر از استفاده از محصول خودداری گردد:
- وجود آسیب در بسته‌بندی استریل
- سپری شدن تاریخ انقضاء
- تغییر رنگ، کدورت و یا وجود ذرات معلق یا رسوب.
5- این محصول حاوی آنتی بیوتیک جنتامایسین سولفات می‌باشد، لذا استفاده از آن در بیمارانی که نسبت به این آنتی بیوتیک حساسیت دارند باید همراه با احتیاط باشد.
6- در زمان استفاده از این محصول به منظور جلوگیری از آلودگی می‌بایست از روش‌های آسپتیک استفاده شود.
7- این محصول تا 7 روز پس از باز شدن بسته‌بندی استریل قابلیت استفاده ایمن را دارد.
 
نکته: در بیشتر موارد، غلظت CO₂ در انکوباتور به میزان 7-5 درصد منجر به قرارگیری pH محیط کشت در بازه مورد پذیرش 4/7 - 2/7 خواهد شد. با این وجود، تنظیم دقیق غلظت CO₂ برای دستیابی به pH تقریبی 3/7 (33/7 - 27/7) به عنوان pH بهینه، به چندین فاکتور از جمله ویژگی‌های فیزیکی انکوباتور و ارتفاع جغرافیایی وابسته است. در نتیجه، توصیه می‌گردد که هر آزمایشگاه غلظت CO₂ مورد نیاز برای دستیابی به pH بهینه 3/7 در محیط کشت را محاسبه نماید.