کاربرد: کشت جنین انسان از مرحله کلیواژ تا بلاستوسیست و یا انتقال جنین در مرحله بلاستوسیست به رحم
REF: RS-G210 10 ml
REF: RS-G230 30 ml
بروشور محیط کشت جنین G2 (دانلود)
پروانه ساخت محیط کشت جنین G2 (دانلود)
گزارش آزمون استریلیتی محیط کشت جنین G2 (دانلود)
گزارش آزمون تب زایی به روش LAL محیط کشت جنین G2 (دانلود)
اطلاعات کلی
کاربرد: کشت جنین انسان از مرحله کلیواژ تا بلاستوسیست و یا انتقال جنین در مرحله بلاستوسیست به رحم
شرایط و مدت زمان نگهداری: در دمای یخچال (℃ 2-8) و به دور از تابش نور نگهداری شود. این محصول تا 10 هفته پس از تاریخ تولید (در صورت باز نشدن بسته بندی استریل) قابل استفاده است.
ملاحظات دفع پسماند: باید طبق دستورالعمل دفع پسماندهای آزمایشگاهی صورت گیرد.
ترکیبات: این محصول حاوی بافر بیکربنات، گلوکز، لاکتات، پیرووات و تمامی اسیدهای آمینه مورد نیاز برای حمایت از رشد و تکوین جنین انسان در شرایط آزمایشگاهی میباشد.
روش استفاده
کارایی پروتکل زیر برای کشت جنین انسان از مرحله کلیواژ تا بلاستوسیست و یا انتقال جنین در مرحله بلاستوسیست به رحم نشان داده شده است و این پروتکل صرفاً به عنوان یک مثال ارائه میگردد:
1- در حدود 12-8 ساعت پیش از استفاده، میزان مورد نیاز از محیط کشت باید با میزان % 10 (حجمی-حجمی) از آلبومین سرم انسان یا HSA (Human Serum Albumin) با غلظت mg/ml 100 جهت تأمین مکمل پروتئینی مخلوط گردد.
2- حجمهای μl 25-100 و یا بالاتر از محیط کشت در دیشهای کشت قطرهگذاری شده و سپس توسط روغن معدنی (Mineral Oil) بطور کامل پوشانده شود.
3- پیش از قرار دادن جنینها، دیش آماده شده در مرحله قبل برای مدت زمان کافی جهت حصول اطمینان از برقراری تعادل pH و دما در انکوباتور CO2 قرار داده شود. بسته به شرایط موجود، این زمان ممکن است بین 8 تا 12 ساعت متغیر باشد. در صورتیکه محیط کشت و روغن معدنی پیش از آمادهسازی دیشها در انکوباتور به تعادل رسیده باشند، مدت زمان مورد نیاز برای برقراری تعادل دیش آماده شده کوتاهتر خواهد بود.
4- در روز سوم تکوین جنین، جنینها در قطرات محیط کشت قرار داده شده و تا روز پنجم تکوین (مرحله بلاستوسیست) در انکوباتور کشت داده شوند.
5- برای انتقال جنین به رحم در روز پنجم تکوین (مرحله بلاستوسیست)، از میزان μl 20-30 از محیط کشت به تعادل رسیده استفاده گردد.
6- بلافاصله قبل از انتقال جنین، کاتتر انتقال توسط محیط کشت شستشو داده شود.
هشدارها
1- کاربر میبایست بطور کامل این راهنما را مطالعه کند و پیش از استفاده از محصول، آموزشهای لازم را دریافت نماید.
2- این محصول برای تزریق به بدن، غیر قابل استفاده است.
3- از استریل کردن مجدد محصول خودداری شود.
4- در صورت مشاهده موارد زیر از استفاده از محصول خودداری گردد:
- وجود آسیب در بستهبندی استریل
- سپری شدن تاریخ انقضاء
- تغییر رنگ، کدورت و یا وجود ذرات معلق یا رسوب.
5- این محصول حاوی آنتی بیوتیک جنتامایسین سولفات میباشد، لذا استفاده از آن در بیمارانی که نسبت به این آنتی بیوتیک حساسیت دارند باید همراه با احتیاط باشد.
6- در زمان استفاده از این محصول به منظور جلوگیری از آلودگی میبایست از روشهای آسپتیک استفاده شود.
7- این محصول تا 7 روز پس از باز شدن بستهبندی استریل قابلیت استفاده ایمن را دارد.
نکته: در بیشتر موارد، غلظت CO2 در انکوباتور به میزان 7-5 درصد منجر به قرارگیری pH محیط کشت در بازه مورد پذیرش 4/7 - 2/7 خواهد شد. با این وجود، تنظیم دقیق غلظت CO2 برای دستیابی به pH تقریبی 3/7 (33/7 - 27/7) به عنوان pH بهینه، به چندین فاکتور از جمله ویژگیهای فیزیکی انکوباتور و ارتفاع جغرافیایی وابسته است. در نتیجه، توصیه میگردد که هر آزمایشگاه غلظت CO2 مورد نیاز برای دستیابی به pH بهینه 3/7 در محیط کشت را محاسبه نماید.